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明胶酶谱MMP活性检测

酶谱法(Zymography)是基于SDS-PAGE电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法检测MMP-2MMP-9活性,其灵敏度可达10pg,高于ELISA方法。其基本原理和程序是:以加有胶原酶底物的SDS-PAGE凝胶分离含蛋白酶的样品,电泳结束后取出凝胶与酶反应Buffer孵育,凝胶染色与脱色。凝胶中由于含底物蛋白而被深染,形成深色背景,但在有蛋白酶条带的位置,蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白,因而不被染色而形成透亮区域,能同时指示MMP-2MMP-9的位置(酶谱),可检测样本有血液、渗出液、细胞提取物等。

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