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RNA干扰流程

RNA干扰实验

RNA干扰(RNA interferingRNAi)现象是指由与靶基因序列同源的双链RNA(DsRNA)引发的基因转录后的沉默过程,小干扰RNA特异性介导相同序列的mRNA降解,阻断相应基因表达。远泰为您提供的RAN干扰技术包括化学合成小RNA片段(SiRNA)和构建载体RNASnRNA)两种形式,客户只需提供干预基因名称或基因序列ID,我们免费设计合适的干预位点,保证至少有一对小RNA有效抑制目的基因表达,抑制效率不低于70%

RNA干扰流程

步骤一  确定干扰基因,设计并合成合适的小干扰RNA(片段型或载体型小干扰RNA)。

步骤二  预转染实验,进行细胞培养,摸索转染条件、时间并进行必要的检测(WBPCR

等),确定干预效果最佳的一对小RNA

步骤三  正式实验,设置合理实验分组,进行瞬时或稳定转染。

步骤四  转染后检测,根据实验要求选择细胞生物学检测、蛋白检测、分子生物学检测等。

以研究小干扰RNA对于细胞、蛋白或基因功能的影响。

RNA干扰检测  

细胞检测      细胞增殖毒性MTT   细胞凋亡   细胞周期   细胞迁移   细胞侵袭

蛋白检测      免疫印迹WB   免疫细胞化学ICC   免疫荧光IF

流式细胞术FCM     酶联免疫ELSIA

分子生物检测  RT-PCR   实时荧光定量PCR   甲基化特异性PCR(MSP)

生化检测    酶类检测    脂类检测    糖类检测

 

1.材料收费标准

   片段型(SiRNA1980/ (含3组小RNA+阴性对照)

  载体型(SnRNA2800/ (含4组小RNA+阴性对照)

2.RNA干扰预实验收费标准

  片段型(SiRNA 2000/每项目(含3组小RNA+阴性对照组+WB检测+定量RT-PCR检测)

  载体型(SnRNA 2500/每项目(含4组小RNA+阴性对照组+ WB检测+定量RT-PCR检测)

3.RNA干扰正式试验收费标准

       细胞培养(普通培养)200/

       细胞培养(转染培养)250/

       细胞爬片50/

注:每组WB检测需要1瓶细胞;PCR检测以及FCM检测需要1瓶细胞

 细胞培养瓶子规格为T255×5cm

4.RNA干扰下游检测收费标准

       参见各章节报价(如WBRT-PCR、定量PCRFCMMTT、细胞迁移、ELSIA生化检测等)

完成时间:视课题设计而定,一般为2个月左右。

 

 

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